Optimización de un método analítico para la separación y cuantificación de flavonoides totales expresados en equivalentes de quercetina, en un extracto del hongo Pleurotus ostreatus mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)

Abstract

Introducción: El hongo Pleurotus ostreatus es reconocido por su alto contenido de flavonoides, como la quercetina, compuestos con importantes intereses en el campo farmacológico, por sus propiedades antiinflamatorias y por su potente poder antioxidante que permite combatir el daño celular causado por los radicales libres. Objetivo: Por esto, este estudio se centra en determinar el aporte de flavonoides de este hongo, estableciendo un método eficiente y reproducible para la separación y cuantificación de flavonoides totales en términos de quercetina mediante cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC). Metodología: Se llevaron a cabo extracciones con diversos solventes, seguidas de una prueba de tricloruro de aluminio mediante la medición espectrofotométrica a 420 nm para determinar la posible cantidad de flavonoides y seleccionar el solvente óptimo para su posterior análisis en HPLC. Resultados: Las condiciones cromatográficas establecidas fueron, una fase móvil de acetonitrilo:agua (35:65), una columna de cormatografia C8, una temperatura de 25°C, un flujo isocrático de 1,0 mL/min, volumen de inyección de 3 uL y longitud de onda de detección de 254 nm. La cuantificación de quercetina se realizó mediante el método de adición estándar, obteniendo una concentración de 40,990 ppm, lo que confirma qué este hongo tiene gran aporte de flavonoides en términos de quecetina.

Alternate abstract:

Introdução: O cogumelo Pleurotus ostreatus é reconhecido por seu alto teor de flavonoides, como a quercetina, compostos com significativo interesse farmacológico, por suas propriedades anti-inflamatórias e por seu potente poder antioxidante que combate os danos celulares causados por radicais livres. Objetivo: Portanto, este estudo se concentra na determinação do teor de flavonoides deste cogumelo, estabelecendo um método eficiente e reprodutível para a separação e quantificação de flavonoides totais em termos de quercetina por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Metodologia: As extrações foram realizadas com diversos solventes, seguidas de um ensaio com tricloreto de alumínio por espectrofotometria a 420 nm para determinar a quantidade potencial de flavonoides e selecionar o solvente ideal para posterior análise por CLAE. Resultados: As condições cromatográficas foram: fase móvel de acetonitrila:água (35:65), coluna cromatográfica C8, temperatura de 25 °C, vazão isocrática de 1,0 mL/min, volume de injeção de 3 uL e comprimento de onda de detecção de 254 nm. A quercetina foi quantificada pelo método de adição de padrões, obtendo-se uma concentração de 40,990 ppm, confirmando que este cogumelo possui alto teor de flavonoides em termos de quercetina.

Alternate abstract:

Introduction: The fungus Pleurotus ostreatus is recognized for its high flavonoid content, such as quercetin, compounds with significant interest in the pharmacological field, due to their anti-inflammatory properties and their powerful antioxidant power that allows them to combat cellular damage caused by free radicals. Objective: Therefore, this study focuses on determining the flavonoid content of this fungus, establishing an efficient and reproducible method for the separation and quantification of total flavonoids in terms of quercetin using high-performance liquid chromatography (HPLC). Methodology: Extractions with various solvents were carried out, followed by an aluminum chloride test using spectrophotometric measurement at 420 nm to determine the potential flavonoid content and select the optimal solvent for subsequent HPLC analysis. Results: The chromatographic conditions were established with a mobile phase of acetonitrile:water (35:65), a C8 column, a temperature of 25 °C, an isocratic flow of 1.0 mL/min, an injection volume of 3 μL, and a detection wavelength of 254 nm. The analyte quantification was performed using the standard addition method, obtaining a concentration of 40.990 ppm, which confirms that this mushroom has a high contribution of flavonoids in terms of quercetin.